La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real (Real Time) es una tecnología ampliamente utilizada en laboratorios de biología molecular, tanto en investigación como diagnóstico clínico.
Esta metodología monitorea la amplificación específica de un producto de ADN generado durante la PCR. Existen dos métodos para la detección del producto de la PCR. El primer método es inespecífico porque emplea un colorante fluorescente que se intercala de manera inespecífica dentro de la doble cadena de ADN, entonces conformen se generan los productos de ADN durante la PCR se intercala el colorante entre la doble cadena incrementando la fluorescencia. El segundo método es específico porque utiliza una sonda que se une de manera específica a una región del producto de ADN amplificado. Esta sonda tiene agregada en un extremo un marcador fluorescente y en el otro una molécula que bloquea la fluorescencia denominada quencher. Entonces cuando la sonda está completa no se detecta fluorescencia por la proximidad del quencher, en cambio cuando la sonda se une de manera específica al ADN se produce el clivaje de la sonda durante la PCR separando el fluoróforo del quencher, permitiendo detectar señal fluorescente.
En ZEV Biotech hemos empleado la metodología de Real Time PCR basado en sondas fluorescentes específicas para desarrollar, producir y comercializar un kit para la detección específica de dos marcadores de SARS-CoV-2 (ver la descripción del kit CoronARdx en la solapa “Productos”). El kit CoronARdx fue aprobado por la ANMAT (ente regulador de Argentina equivalente a la FDA en USA) como método de diagnóstico in-vitro (IVD) en humano.